Фагоцитоз

⇐ ПредыдущаяСтр 172 из 266

Фагоцитарное число: норма — 5—10 микробных частиц. Фагоцитарное число — среднее количество микробов, поглощенных одним нейтрофилом крови. Характеризует поглотитель­ную способность нейтрофилов.

Фагоцитарная емкость крови (ФЕК): норма — 12,5—25-Ю9 на 1 л крови. ФЕК — коли­чество микроорганизмов, которое могут поглотить нейтрофилы 1 л крови.

Фагоцитарный показатель: норма — 65—95 %. Фагоцитарный показатель — процент нейтрофилов, участвующих в фагоцитозе.

Количество активных фагоцитов (КАФ): норма — 1,6—5,0-109 в 1 л крови. КАФ — абсо­лютное число фагоцитирующих нейтрофилов в 1 л крови.

Индекс завершенности фагоцитоза: норма > 1,0.Индекс завершенности фагоцитоза — переваривающая способность фагоцитов.

Фагоцитарная активность нейтрофилов обычно повышается в начале развития воспали­тельного процесса. Ее снижение ведет к хронизации воспалительного процесса и поддержа­нию аутоиммунного процесса, так как при этом нарушается функция разрушения и выведе­ния иммунных комплексов из организма.

Заболевания и состояния, при которых изменяется фагоцитарная активность нейтрофи­лов, представлены в табл. 7.27.

Спонтанный тест с НСТ в крови

Величина спонтанного теста с НСТ в крови в норме: у взрослых число НСТ-положитель-ных нейтрофилов— до 10%.

Спонтанный тест с НСТ (нитросиний тетразолий) позволяет оценить степень антиген­ной раздраженности неактивированных in vitro гранулоцитов крови. Он характеризует сте­пень активации внутриклеточных антибактериальных систем. Принцип метода основан на восстановлении поглощенного фагоцитом растворимого красителя нитросинего тетразолия в нерастворимый диформазан под влиянием супероксиданиона, образующегося в НАДФ-Н-оксидазной реакции, инициирующей процесс стимуляции фагоцита. Показатели НСТ-теста повышаются в начальном периоде острых бактериальных инфекций, тогда как при подо-стром и хроническом течении инфекционного процесса они снижаются. Санация организма от возбудителя сопровождается нормализацией показателя. Резкое снижение свидетельствует о декомпенсации противоинфекционной защиты и является прогностически неблагоприят­ным признаком.

Снижение спонтанного теста с НСТхарактерно для хронизации воспалительного про­цесса, врожденных дефектов фагоцитарной системы, вторичных и первичных иммунодефи-цитов, СПИДа, злокачественных новообразований, тяжелых ожогов, травм, стрессов, недо­статочности питания, лечения цитостатиками и иммунодепрессантами, облучения ионизи­рующей радиацией.

Повышение спонтанного теста с НСТотмечается при антигенном раздражении вследствие бактериального воспаления (продромальный период, период острого проявления инфекции при нормальной активности фагоцитоза), хроническом гранулематозе, лейкоцитозе, усилении антителозависимой цитотоксичности фагоцитов, аутоаллергических заболеваниях, аллергии.

Активированный тест с НСТ в крови

Величина активированного теста с НСТ в крови в норме: у взрослых число НСТ-положи-тельных нейтрофилов — 40—80%.

Активированный тест с нитросиним тетразолием позволяет оценить функциональный резерв кислородзависимого механизма бактерицидности фагоцитов. Тест используют для выявления резервных возможностей внутриклеточных систем фагоцитов. При сохраненной внутриклеточной антибактериальной активности в фагоцитах резко возрастает число форма-занположительных нейтрофилов после их стимуляции латексом. Снижение показателей ак­тивированного НСТ-теста нейтрофилов ниже 40 % и моноцитов ниже 87 % свидетельствует о недостаточности фагоцитоза.

Лизосомально-катионный тест (ЛКТ) в крови

Величина ЛКТ в крови внорме: средний цитохимический коэффициент (СЦК) для ЛКТ— 1,3—1,8усл. ед.

Тест позволяет оценить активность кислороднезависимого механизма бактерицидности фагоцитов по уровню катионных белков в лизосомах, которые способны обезвреживать фаго­цитированные бактерии. Катионные белки — это модификаторы дыхательных и ферментатив­ных процессов в фагоците, медиаторы воспаления. Они содержатся в лизосомах нейтрофилов и эозинофилов и являются маркерами клеток гранулоцитарного ряда. Высокий уровень кати­онных белков в фагоцитах является благоприятным прогностическим признаком при воспали­тельных процессах и свидетельствует о высокой бактерицидности фагоцитирующих клеток. Тест может быть использован для диагностики миелоидных форм лейкозов, определения судь­бы фагоцитированных бактерий в очагах воспаления и оценки процесса заживления ран. За­болевания и состояния, при которых изменяется ЛКТ, представлены в табл. 7.28.

Таблица 7.28. Заболевания и состояния, при которых изменяется ЛКТ

Повышение показателя Снижение показателя
Хронический гранулематоз Эозинофилия Атопическая аллергия (астма, ринит) Паразитарные инфекции Аллергические заболевания Усиление антителозависимой цитотоксичности фагоцитов и иммунологической реакции на донорский трансплантат Хронические воспалительные заболевания, дефекты фагоцитарной системы, синдром Чедиака—Хигаси Хронические бактериальные инфекции Злокачественные новообразования с метастазами СПИД Лечение цитостатиками и иммунодепрессантами, облучение ионизирующей радиацией

Окислительный метаболизм гранулоцитов крови (ОМГ-тест)

Величина ОМГ-теста у взрослых в норме — 141—214 нмоль/мл.

ОМГ-тест позволяет оценить супероксиданионобразующую функцию гранулоцитов крови, «взрыв дыхания» в ответ на антигенную стимуляцию. ОМГ-тест — это показатель ак­тивности, завершенности фагоцитоза и антителозависимой цитотоксичности фагоцитов. При нарушении «взрыва» окислительного метаболизма фагоциты не способны к образова­нию интермедиатов кислорода, в результате чего организм больного становится особенно чувствительным ктем микроорганизмам, которые содержат антирадикальные ферменты (стафилококк, кишечная палочка, церрация, кандида, аспергилиус, хромобактерии). Кисло-родзависимый механизм бактерицидности играет ведущую роль в защите от инфекций. За­вершенность фагоцитоза в конечном счете зависит от продукции этими клетками суперокси-данионрадикала. Именно нарушения в процессе образования этого соединения являются причиной утраты резистентности при гранулематозной болезни. Антителозависимая цито-токсичность фагоцитов также обусловлена метаболизмом кислорода. Вместе с тем образую­щиеся радикалы кислорода могут оказывать повреждающее действие и на собственные ткани, что ведет к развитию воспаления (аутоиммунные процессы). Заболевания и состоя­ния, при которых изменяется ОМГ-тест, представлены в табл. 7.29.

Таблица 7.29. Заболевания и состояния, при которых изменяется ОМГ-тест

Повышение показателя Снижение показателя
Аутоиммунные заболевания Туберкулез Усиление антителозависимой цито-токсичности фагоцитов и иммуно­логической реакции на донорский трансплантат Хронизация воспалительного процесса за счет недостаточности фагоцитоза или врожденных дефектов фагоцитарной системы Тяжелые ожоги, травмы, СПИД Недостаточность питания Новообразования Лечение цитостатиками и иммунодепрессантами, облучение ионизирующей радиацией

Фагоцитоз – это один из жизненно важных механизмов работы нашего иммунитета. Если бы не полимикробный фагоцитоз, мы бы были практически беззащитны против бесчисленного количества бактерий, грибков, вирусов и паразитов, которые ежедневно нас атакуют. Кстати, за сутки мы несколько сотен раз подвергаемся реальному риску заразиться каким-нибудь инфекционным или паразитарным заболеванием, и только иммунная система нас от этого и уберегает.

Фагоцитоз – важное звено защиты здоровья. Но известно, что он может протекать с различной степенью эффективности. От чего это зависит, и как можно определить показатели фагоцитоза, отражающие его «качество»?

Фагоцитоз при различных инфекциях:

Фактически первое, от чего зависит прочность защиты – это сам микроб, который «нападает» на организм. Некоторые микроорганизмы имеют особые свойства. Благодаря этим свойствам клетки, которые участвуют в фагоцитозе, не могут их уничтожить.

Например, возбудители токсоплазмоза и туберкулеза поглощаются фагоцитами, но при этом продолжают развиваться внутри них безо всякого вреда для себя. Это достигается потому, что они тормозят фагоцитоз: мембрана микробов выделяет вещества, которые не позволяют фагоциту воздействовать на них ферментами его лизосом.

Некоторые стрептококки, стафилококки, а также гонококки тоже могут припеваючи жить и даже размножаться внутри фагоцитов. Эти микробы вырабатывают соединения, обезвреживающие вышеупомянутые ферменты.

Хламидии и риккетсии не только обосновываются внутри фагоцита, но и устанавливают там свои порядки. Так, они растворяют «мешок», в который их «ловит» фагоцит, и переходят в цитоплазму клетки. Там они существуют, используя ресурсы фагоцита для своего питания.

Наконец, вирусы вообще труднодостижимы для фагоцитоза: многие из них сразу же проникают в ядро клетки, встраиваются в ее геном и начинают управлять ее работой, неуязвимые для иммунной защиты и оттого очень опасные для здоровья.

Таким образом, о возможности неэффективного фагоцитоза можно судить уже по тому, чем именно человек болеет.

Хламидии

Анализы, определяющие качество фагоцитоза:

В фагоцитозе участвуют главным образом две разновидности клеток: нейтрофилы и макрофаги. Поэтому, чтобы узнать, насколько хорошо протекает фагоцитоз в организме человека, врачи изучают показатели преимущественно этих клеток. Ниже приведен перечень анализов, позволяющих узнать, насколько у пациента активен полимикробный фагоцитоз.

1. Общий анализ крови с определением количества нейтрофилов.

2. Определение фагоцитарного числа, или фагоцитарной активности. Для этого из образца крови извлекают нейтрофилы и наблюдают за тем, как они осуществляют процесс фагоцитоза. В качестве «жертв» им предлагают стафилококков, кусочки латекса, грибки Candida. Число профагоцитировавших нейтрофилов делят на их общее количество, и получается искомый показатель фагоцитоза.

3. Подсчет фагоцитарного индекса. Как известно, каждый фагоцит на протяжении жизни может уничтожить несколько вредоносных объектов. При подсчете фагоцитарного индекса лаборанты считают, сколько бактерий было захвачено одним фагоцитом. По «прожорливости» фагоцитов делают вывод о том, насколько хорошо осуществляется защита организма.

4. Определение опсонофагоцитарного индекса. Опсонины – это вещества, усиливающие фагоцитоз: мембрана фагоцитов лучше реагирует на присутствие вредоносных частиц в организме, а процесс их поглощения проходит активнее, если в крови много опсонинов. Опсонофагоцитарный индекс определяют соотношением фагоцитарного индекса сыворотки пациента и такого же индекса нормальной сыворотки. Чем индекс выше, тем лучше идет фагоцитоз.

5. Определение скорости перемещения фагоцитов к попавшим в организм вредоносным частицам проводится особой реакцией торможения миграции лейкоцитов.

Есть и другие анализы, позволяющие определить возможности фагоцитоза. Не будем утомлять читателей подробностями, скажем лишь, что получение информации о качестве фагоцитоза возможно, и для этого следует обратиться к иммунологу, который расскажет, какие конкретно исследования надо сделать.

Если есть основания полагать, что у вас слабый иммунитет, или если вы точно об этом знаете по результатам проведенных анализов, вам следует начать прием препаратов, которые благоприятно подействуют на эффективность фагоцитоза. Лучшим из них на сегодняшний день является иммуномодулятор Трансфер Фактор. Его обучающее воздействие на иммунитет, которое реализуется благодаря присутствию в средстве информационных молекул, позволяет нормализовать все протекающие в иммунной системе процессы. Прием Трансфер Фактора – это необходимая мера для улучшения качества всех звеньев работы иммунитета, а значит, залог сохранения и укрепления здоровья в целом.

Полное исследование иммунитета не относится к рутинным анализам. Из-за высокой стоимости реактивов и потребности в специальном оборудовании, сделать иммунограмму можно только в крупных многопрофильных больницах или частных медицинских лабораториях. Несмотря на это, выполнение процедуры может потребоваться любому человеку, у которого были обнаружены признаки иммунодефицита без каких-либо явных причин, таких как ВИЧ, сахарного диабета, онкологического заболевания и т.д.

Чаще всего, выполнение иммунограммы требуется детям дошкольного и школьного возраста, так как именно в этот период жизни происходит «дебют» ряда наследственных заболеваний.

Что такое иммунограмма?

Это специальный анализ крови, который позволяет оценить количество различных иммунных клеток, вырабатываемых ими антител и ряда других веществ, свидетельствующих о состоянии защитных систем организма. В зависимости от цели исследования и возможностей лаборатории, количество исследуемых параметров может существенно варьироваться. Расширенное исследование позволяет изучить более 25 различных показателей – такой анализ выявляет даже скрытые нарушения, которые невозможно обнаружить стандартными методиками.

Иммунитет человека можно условно разделить на два звена – «медленное» (гуморальное) и «быстрое» (клеточное). Быстрое звено реагирует практически сразу после попадания возбудителя болезни (вируса, гриба, бактерии, простейших и т.д.) в организм. В задачу этой группы клеток входят следующие функции:

  1. Поглотить и «переварить» вредоносного агента;
  2. Презентировать или «рассказать» о патогенном микроорганизме другим иммунным клеткам, которые не могут самостоятельно его обнаружить;
  3. Уничтожить наибольшее количество выявленных микробов;
  4. Бороться с различными опухолями и аутоиммунными процессами – еще одна важная функция иммунитета, которая часто не позволяет организму самостоятельно справиться с болезнью.

После того, как «быстрое» звено поглотило чужеродное тело и рассказало о нем «медленному» звену, запускается медленный процесс создания и выброса антител в кровь. Антитела – это вещества, уничтожающие определенный вид патогенного агента. Они очень специфичны и, в большинстве случаев, помогают организму окончательно справиться с имеющимся заболеванием. В среднем, продолжительность их создания составляет 2-3 недели.

Показатели иммунограммы отражают работу каждого из звеньев защиты. Именно на основании их изменений делается вывод об отсутствии/наличии иммунодефициты, о варианте нарушения и оптимальном методе терапии.

Звено иммунитета, исследуемый параметр Функция

Клеточное («быстрое»)

Цитотоксические Т-клетки (CD3+, CD8+) Распознавание вредоносных микроорганизмов и их уничтожение
Т-хелперы (CD4+) «Рассказывают» о наличии патогена другим клеткам-защитникам, играют существенную роль в формировании длительного иммунитета.
Т-супрессоры (CD8+) Регуляция активности защитных систем, предохраняют организм от развития аутоиммунных реакций (когда вырабатываются антитела против здоровых тканей)
Т-клетки с рецептором для ИЛ-2 (CD25+)
Носители маркера апоптоза (CD95+) Контроль скорости процесса самоуничтожения клеток

Гуморальное («медленное»)

В-клетки (CD+, 19CD+)

Отвечают за выработку специфических антител. В большинстве случаев, именно благодаря данному пулу клеток происходит полное выздоровление.

Защищают организм от повторного заражения той же самой инфекцией, в течение определенного времени.

Иммуноглобулин G Антитела, вырабатываемые В-клетками. При связывании с вредоносным микробом – разрушают его стенку, вследствие чего наступает гибель.
Иммуноглобулин M
Иммуноглобулин A
Иммуноглобулин Отвечает за развитие любых аллергических реакций.

Неспецифические показатели (отражают работу обоих звеньев)

стественные/натуральные киллеры (CD16+) или NK-клетки Обеспечивают естественный противоопухолевый иммунитет
Клетки с HLA маркером Отражает активность работы иммунных механизмов
Фагоцитоз Распознавание, поглощение и презентация Т-клеткам вредоносных агентов
Реакция торможения миграции лейкоцитов (сокращенно – РТМЛ) Лабораторный тест, отражающий работу клеточного звена.
НСТ-тест Позволяет оценить активность фагоцитоза
Комплемент Предотвращает формирование больших по размеру иммунных комплексов (соединений вредоносных частиц с антителами). Участвует в нейтрализации микробов

В некоторых случаях, доктор может порекомендовать дополнить анализ исследованием содержания интерлейкинов в крови – это специальные вещества, которые обеспечивают взаимосвязь различных компонентов защитных систем. При нарушении их выработки также могут формироваться иммунодефицитные состояния.

реклама

Показания

  1. Частые тяжелые инфекционные заболевания, особенно у детей дошкольного и школьного возраста. На данный момент, отсутствует единое мнение о том, что считать «частыми» и «тяжелыми» инфекциями. Однако начать подозревать проблемы с иммунитетом следует при следующих ситуациях:
    1. ОРВИ у детей легкой и средней тяжести чаще 5-6 раз в год;
    2. У взрослых (кроме пожилых лиц) – чаще 3-х раз в год;
  2. Наличие в прошлом эпизодов следующих заболеваний: некротической ангины, рожи, кандидозного орофарингита, системной герпетической инфекции, атипичных пневмоний (микоплазменной, хламидийной, пневмоцистной), любые грибковые заболевания у детей (кроме грибка ногтей на ногах);
  3. Обнаружение в крови низкого уровня лейкоцитов без какой-либо явной причины: перенесенной вирусной инфекции, наличие аутоиммунного или онкологического заболевания, вторичных иммунодефицитов (ВИЧ, сахарного диабета, апластической анемии, последствия приема некоторых лекарств и т.д.). Норма лейкоцитов для людей от 15-ти лет: от 4 до 9*109 клеток/литре. При исследовании крови у детей необходимо пользоваться повозрастными нормами.

Перед исследованием иммунограммы, необходимо исключить наличие вторичных иммунодефицитов, которые были перечислены выше. Обнаружить их достаточно просто, с помощью обычных анализов крови, при этом стоимость их будет значительно ниже, чем обследование функции лейкоцитов и других фагоцитов.

Подготовка к процедуре

Для получения объективных результатов необходимо правильно действовать перед забором крови. Для этого достаточно руководствоваться следующими простыми правилами:

  1. Проходить обследование лучше в утренние часы, натощак. При отсутствии такой возможности, допустимо сдать кровь в любое другое время после 4-х часового периода голода;
  2. В течение 3-х часов перед анализом не рекомендуется употреблять алкоголь, кофеин-содержащие напитки, энергетики. Воду и некрепкий чай можно пить без ограничений;
  3. За несколько часов до процедуры не следует курить или находиться в присутствии курящего человека;
  4. Непосредственно перед сдачей крови следует исключить значительные физические нагрузки (бег, подъем тяжестей, занятия спортом), контрастные водные процедуры, переохлаждение/перегревание организма;
  5. Для получения наибольшей информативности, иммунограмму ребенку и взрослому лучше проводить в период полного здоровья. Во время болезни организм будет реагировать на повреждение собственных тканей или на инфекцию, поэтому делать вывод о картине крови достаточно сложно.

Норма

Расшифровка иммунограммы намного сложнее, чем анализ обычного анализа крови. Данное исследование включает в себя большое количество показателей, которые не только нужно сверять с существующими нормами, но и анализировать их в комплексе. Однако, в первую очередь, необходимо знать нормальные значения.

В разных лабораториях они могут несколько отличаться. Это связано с использованием различных средств, методов диагностики и реактивов. Как правило, нормы иммунограммы приведены на листе с результатами обследования. Если они отсутствуют, мы предлагаем воспользоваться следующей таблицей иммунограммы:

Нажмите для увеличения

Принципы расшифровки результатов

Анализ иммунограммы должен проводить специалист с квалификацией «врач-иммунолог». В этом случае, вероятность получения правильного заключения крайне высока. Доктор проводит комплексную оценку всех параметров, с целью определения наличия/отсутствия проблем в клеточном или гуморальном звене иммунитета. От этого будет зависеть дальнейшая тактика лечения, метод поддержания иммунитета и профилактика частых инфекций.

  • В большинстве случаев, снижение показателей, отражающих состояние клеточного или «быстрого» звена является признаком проблемы с активацией или выработкой Т-клеток.
  • Исключение составляет количество Т-супрессоров – о снижении защитных функций человека будет свидетельствовать повышение этого пула клеток. Такие результаты, полученные при расшифровке иммунограммы у детей, нередко является признаком первичного Т-клеточного иммунодефицита. Это группа врожденных заболеваний, при которых организм не может своевременно и достаточно хорошо «отражать атаки» враждебных микроорганизмов.
  • О проблемах в гуморальном звене будет свидетельствовать сниженное количество В-клеток и иммуноглобулинов (кроме IgE, который отвечает за развитие аллергии). Следует помнить, что значимым является только одновременное снижение и концентрации В-лимфоцитов и вырабатываемых ими антител (иммуноглобулинов).

Другие показатели позволяют уточнить характер нарушений и подтвердить предполагаемый диагноз. Необходимо еще раз подчеркнуть, что правильно интерпретировать этот сложный анализ может только врач-иммунолог.

реклама

Определение степени иммунных нарушений

Существует большое количество подходов, для оценки состояния пациента. Часть из них предлагают подсчет количества заболеваний с учетом их тяжести за год, другие являются чисто расчетными методами. По иммунограмме также можно определить выраженность нарушений работы гуморального и клеточного звена или оценивать эффективность лечения на протяжении определенного количества времени.

Для этого необходимо воспользоваться следующей формулой:

((Патологический показатель больного / Норма данного показателя ) – 1 ) * 100%

В качестве исследуемого параметра, чаще всего используют количество В-клеток, Цитотоксических клеток или Т-хелперов. Если полученный результат имеет отрицательное значение, можно определить выраженность нарушений и потребность в активной медикаментозной терапии:

Результат расчета Интерпретация Потребность в фармакотерапии
Меньше 34% Незначительные нарушения Отсутствует, за исключением тех состояний, при котором человека беспокоят частые и тяжелые инфекционные болезни
34-66% Умеренные нарушения Необходимо
Больше 66% Выраженный иммунодефицит

Причины ложных результатов

Помимо врожденных особенностей иммунитета существует большое количество патологий, которые приводят к изменению показателей анализа. Чтобы не запутаться, необходимо понимать, что показывает иммунограмма на самом деле. Она отражает количество и состояние различных групп лейкоцитов и фагоцитов – клеток крови и внутренних органов, ответственных за защиту организма.

Традиционно, иммунограмма используется для выявления наследственных нарушений иммунитета. Поэтому перед ее проведением следует исключить наличие наиболее распространенных состояний, способных также оказывать негативное влияние на естественную защиту человека. К ним относятся:

  • Злокачественные опухоли любого органа;
  • Аутоиммунные заболевания: ревматоидный артрит, системные склеродермия и волчанка, различные системные васкулиты (в том числе болезнь Бехчета, микроскопический и гигантоклеточные васкулиты, узелковый периартериит и т.д.);
  • Вирусные заболевания, в том числе ВИЧ, «кровяные» гепатиты;
  • Выраженные интоксикации: алкоголем, наркотическими веществами, промышленными вредными веществами, ядами и т.д.;
  • Апластические анемии – группа болезней, при которых нарушается рост и созревание всех клеток крови;
  • Последствия радиационного облучения.

Также необходимо помнить, что причиной ложного повышения или снижения параметров может быть неправильная подготовка к сдаче крови. Только после исключения всех вышеперечисленных состояний можно говорить о наличии первичного иммунодефицита. В качестве подтверждающего теста можно использовать медико-генетическое исследование.

«Мифы» об иммунитете

Свежие фрукты и овощи поправят пошатнувшийся иммунитет

Несомненно, эти продукты полезны при многих заболеваниях. В частности, они являются источником растительной клетчатки, которая стимулирует нормальное пищеварение. При атрофии слизистой желудка, они улучшают выделение пищеварительных соков и помогают в переработке пищи. Однако количество получаемых витаминов из фруктов и овощей крайне незначительно и не может помочь в лечении иммунных расстройств;

Выявленный иммунодефицит у ребенка можно не лечить – после полового созревания он пройдет самостоятельно

Такое мнение очень распространено не только среди населения, но и среди определенной группы докторов. Подобное суждение очень опасно – вопрос о необходимости лечения в каждом индивидуальном случае решает врач-иммунолог. И если риск возникновения частых и тяжелых инфекций превышает риск возникновения побочного действия от лекарств (которые достаточно редки), проведение терапии необходимо для ребенка;

Иммуномодуляторы абсолютно бесполезны в лечении иммунодефицитов

Несколько лет назад было проведено большое исследование, которое подтвердило, что использование иммуномодуляторов уменьшает продолжительность лечения ОРВИ только на 1 сутки и менее. То есть имеют совершенно незначительный эффект. Этот аргумент часто используют некоторые доктора и пациенты, обосновывая свой отказ от их применения при первичных иммунодефицитах. Вас ничего не смущает в этом аргументе?

  • Во-первых, целью исследования было оценить влияние на продолжительность лечения, но не на профилактику возникновения инфекционных заболеваний.
  • Во-вторых – оно проводилось на здоровых людях, которые не страдали иммунодефицитами. Если изучить зарубежную литературу и результаты подходящих исследовательских работ, то можно обнаружить следующую информацию. Иммуномодуляторы обладают относительно небольшой эффективностью, но они профилактируют развитие тяжелых и частых инфекций у людей с первичными иммунодефицитами, а также снижают вероятность смертельного исхода.

На данный момент, за рубежом существуют другие – более эффективные лекарственные средства для поддержания защитных систем организма. Одна их цена многократно выше, а доступность в России крайне ограничена. Поэтому иммуномодуляторы, лизаты микроорганизмов, препараты интерферона являются одним из вариантов лечения данных заболеваний в РФ.

ВИЧ нужно диагностировать по иммунограмме

Несомненно, при длительном действии вируса иммунодефицита снижается количество CD4+ клеток. Именно по этому показателю, часто оценивают тяжесть заболевания и вероятность развития смертельно опасных инфекций, ассоциированных со СПИД и ВИЧ. Однако для диагностики этой инфекции необходимо использовать более специфические методы, такие иммуноферментный анализ (ИФА) и иммуноблотинг.

Селезнева Валентина Анатольевна врач-терапевт

(13 Голосов)

Характеристика лимфоидной системы.

1. Определяют общее количество лимфоцитов при подсчете формулы крови. В норме их 20-26% среди других лейкоцитов (около 2000 клеток в 1 мм3 крови).

2. Подсчитывают процент и количество Т-лимфоцитов. Среди лимфоцитов крови в норме их 50-70% (1000-1400 клеток в 1 мм3 крови). Для этого подсчитывают количество лимфоцитов, образующих розетки с эритроцитами барана. К взвеси лейкоцитов добавляют равный объем 1% взвеси отмытых эритроцитов барана и инкубируют при 37°С 15 мин и ночь при 40°С;

— осадок ресуспензируют, добавляют раствор глютарового альдегида до конечной концентрации 0,06% для фиксации розеток и сразу делают мазки,

— мазки высушивают, фиксируют спиртом и окрашивают ядро красящими красителями (например, по Романовскому-Гимзе);

— подсчитывают процент лимфоцитов, связавших более трех эритроцитов — Т-лимфоцитов.

В настоящее время Т-лимфоциты определяют с помощью моноклональных антител к CD-антигенам (CD2, CD3) в реакции иммунной флюоресценции с учетом результатов на проточном цитофотометре (норма 70-85%).

3. Определяют содержание Т-хелперов и Т-супрессоров с помощью моноклональных антител к CD4 (Тх) и CD8 (Тс) антигенам.

4. Для выявления активированных Т-клеток определяют рецептор к ИЛ-2 (CD25), HLA-DR антигены и CD71 (рецептор для трансферрина).

5. Определяют уровень интерлейкинов в крови.

Исследуют также функциональные показатели Т-лимфоцитов: пролиферативную активность (см. РБТЛ, РПМЛ), цитотоксическую активность. Показатели Т-лимфоцитов снижаются при Т-клеточных иммунодефицитах.

Характеристика В-лимфоцитов.

1. Общее количество В-лимфоцитов можно определить с помощью моноклональных антител к антигенам CD19-CD22, CD72. Применяют также антитела к иммуноглобулинам, которые находятся на поверхности В-лимфоцитов. В-лимфоциты составляют 20-25% всех лимфоцитов (600-800 клеток в 1 мм3 крови).

2. Функциональные продукты В-лимфоцитов — иммуноглобулины G, М, А классов в сыворотке крови и различных биологических жидкостях определяют с помощью реакции преципитации по Манчини. Для этого на одну стеклянную пластинку наливают 2% агар, смешанный с антителами против IgG; на вторую пластинку — с антителами против IgM, на 3-ю — против IgA. После застывания в агаре делают лунки диаметром 2 мм. В один ряд лунок каждой пластины вносят стандартную сыворотку с известной концентрацией IgG, IgM, IgA. В другие лунки добавляют исследуемые сыворотки крови больных. Иммуноглобулины диффундируют в агар и на месте встречи с антителами, которые находятся в агаре, образуется кольцо преципитации. Диаметр кольца зависит от концентрации Ig (чем больше Ig, тем больше диаметр). Измеряют диаметр зоны преципитации для стандартной сыворотки и по ней строят график зависимости диаметра кольца преципитации от количества Ig в сыворотке крови. Затем измеряют диаметр кольца преципитации исследуемой сыворотки, наносят на построенный график и определяют концентрацию иммуноглобулина. Для определения секреторного IgA (в слюне и др.) используют аналогичный метод в двух вариантах: определяют IgA (а-цепь) и его секреторный компонент с помощью соответствующих антител. В норме у взрослых: 0,8-2 г/л IgM; 8,0-13,0 г/л IgG; 1,4-3,0 г/л IgA. У новорожденных уровень IgG близок к материнскому, IgM и IgA имеются в следовых концентрациях. К 4-6 мес. уровень IgG падает до 5-6 г/л, а затем увеличивается. При нормальном развитии уровень иммуноглобулинов к 2-м годам у детей близок величинам их у взрослых.

Уровень секреторного IgA в слюне должен быть 0,03-0,4 г/л.

При иммунодефицитах уровень иммуноглобулинов снижается, а при стимуляции СИ и воспалении — повышается.

Характеристика системы макрофагов и гранулоиитов.

1. Определяют количество лейкоцитов в крови и соотношение их видов (нейтрофилы, базофилы, эозинофилы, моноциты).

2. Оценивают поглотительную и переваривающую активность фагоцитов: к взвеси лейкоцитов или капле крови добавлять взвесь отмытой суточной культуры стафилококков или кишечной палочки. Готовят 3 пробы, инкубируют при 37°С 1-ю пробу 45 мин, 2-ю — 60 мин, 3-ю — 90 мин. Делают мазки, высушивают их, фиксируют этанолом и окрашивают по Романовскому.

Определяют фагоцитарный индекс и фагоцитарное число. Фагоцитарный индекс — это среднее количество частиц или микроорганизмов в одном фагоците (норма 3-8).

Фагоцитарное число — это количество фагоцитов, участвующих в фагоцитозе (норма — 60-80%).

Оценка показателей через разные промежутки времени позволяет оценить динамику фагоцитоза. В норме через 90 мин фагоцитарный индекс должен быть ниже, чем через 45 мин и 60 мин, в связи с перевариванием микробов. При нарушении переваривания он не меняется.

Переваривание микробов можно оценивать путем посева лизатов лейкоцитов на питательные среды и подсчета выросших колоний. Метод предполагает использование в качестве объекта фагоцитоза живых микроорганизмов. После инкубирования с микробами (см. выше) фагоциты осаждают центрифугированием, отмывают и лизируют. Их лизаты высевают на твердую питательную среду . Переваривающую активность фагоцитов оценивают по числу выросших колоний.

Метаболическую активность фагоцитов определяют после окраски их 0.25% раствором нитросинего тетразолия. В норме метохроматично (диффузно и в виде глыбок голубого цвета) окрашивается 15-18% нейгрофилов, при инфекциях их число увеличивается до 40% и более.

Показатели фагоцитов снижаются при соответствующих иммунодефицит, повышаются — при благоприятном течении инфекции.

3. С помощью моноклональных антител определяют антигены дифференцировки, активации и адгезии (CD14, CD11, CD18, HLA-DR и др.)

4. Выявляют рецепторы к СЗ компоненту комплемента, к иммуноглобулинам и др.

5. Оценивают спонтанную и направленную миграцию (хемотаксис).

6. Определяют способность секретировать цитокины (ИЛ-1, ФНО и др.) и их уровень в крови.

Характеристика системы комплемента.

1. Определяют гемолитическую активность комплемента в реакции гемолиза с использованием гемолитической системы. Эта система состоит из эритроцитов барана, обработанных гемолитической сывороткой.

Определение комплемента основано на способности продуктов его активации вызывать лизис эритроцитов, покрытых антителами. По степени гемолиза судят о гемолитической активности комплемента.

В качестве единицы измерения комплемента используется 50% единица (СН50) — количество комплемента, вызывающее 50%-ный лизис 0.5.мл стандартной суспензии сенсибилизированных эритроцитов при температуре 37°С в течение 60 мин. Титрование комплемента сводится к определению одной 50%-ной гемолитической единицы — объема сыворотки, который содержит СН50. Для этого к различным дозам сыворотки прибавляют стандартное количество сенсибилизированных эритроцитов, а затем устанавливают объем сыворотки, при котором происходит 50%-ный гемолиз.

Степень гемолиза при титровании комплемента можно определять фотометрическими методами (с помощью спектрофотометра, фотоколориметра, нефелометра) или же визуально путем сравнения интенсивности гемолиза в опытных пробирках со стандартной шкалой лизированных эритроцитов.

2. Выявляют продукты активации С4а, СЗа, С5а и др.

4. С помощью антител против C1q, меченных флюоресцеином выявляют отложения комплемента с иммунными комплексами в биоптатах тканей.

5. Определяют комплементсвязывающие рецепторы на лейкоцитах (CR1, CR2, CR3).

Характеристика системы тромбоиитов.

1. Подсчитывают абсолютное количество в крови.

2. Оценивают способность к агрегации под влиянием неспецифических факторов и антигенов (при наличии адсорбированных антител).

3. Ставят тромбоцитопенический тест при введении аллергенов в организм.

4. Выявляют медиаторы, выделяемые тромбоцитами.

< Предыдущая

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *